Laboratoire Francis PERRIN
URA CNRS-CEA 2453
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Spectroscopies de fluorescence résolue en temps appliquées à l’étude des interactions moléculaires en biologie Séminaires SPAM LFP
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09/10/2008 à 11h00
LIDYL Bât 522, p 138 CEA-Saclay
Jean-Claude BROCHON
Les interactions entre molécules d’intérêt biologique s’accompagnent souvent de changements de conformation et de dynamique structurale qui peuvent être détectés par spectroscopie de fluorescence stationnaire ou résolue en temps. D’autre part une interaction peut être mise directement en évidence quand elle s’accompagne d’un accroissement de volume lié à la formation d’un complexe. Deux types de mesure de ces changements de volume seront présentés, d’une part l’anisotropie de fluorescence résolue en temps et d’autre par la spectroscopie de corrélation de fluorescence (FCS). La sélectivité et la sensibilité de la FCS autorisent des mesures à un niveau de détection de la molécule unique. Elle permet également l’étude du comportement des biomolécules dans les cellules à des concentrations physiologiques, notamment les interactions moléculaires à partir d’une technique dérivée (FCCS) : la spectroscopie de corrélation croisée des émissions de deux entités fluorescentes différentes. Ces méthodes seront illustrées par des exemples d’applications sur les interactions d’un enzyme du virus VIH-1 avec l’ADN. D’autre part quelques résultats préliminaires sur la luminescence résolue en temps de Quantum Dots seront brièvement présentés.